Initiation théorique et pratique à la technique PCR (Polymerase Chain Reaction.

THEORIE

RAPPELS FONDAMENTAUX DE BIOLOGIE MOLECULAIRE

TECHNIQUE PCR

• Principe
• Généralités
• Rappels sur les acides nucléiques
• Cycles de la réaction
• Plateau
• Détection des produits amplifiés
• Paramètres
• ADN polymérase thermorésistantes (Taq pol…)
• Amorces
• dNTP
• Mg2 +
• Autres paramètres
• PCR inverse
• Faux positifs
• Faux négatifs
• Echantillon

DIFFERENTES APPLICATIONS DE LA PCR

TRAVAUX PRATIQUES

• PCR multiplex avec une révélation en point final : extraction d’ADN, contrôle des ADN extraits, préparation des mix d’amplification, réalisation PCR (amplification), contrôle de l’amplification par électrophorèse en gel d’agarose